PROJETOS

Giardia lamblia é o nome científico de um protozoário enteroparasita que causa uma das Doenças Tropicais Negligenciadas mais comuns do mundo: a giardíase. Ao redor do mundo, cerca de 280 milhões de pessoas, na sua maioria de classes menos favorecidas, sofrem com a giardíase. Como o próprio termo já diz, a doença é negligenciada e pouquíssimas pesquisas são desenvolvidas sobre esse assunto. Esse protozoário afeta principalmente o trato gastrointestinal de humanos, onde se localiza também a microbiota intestinal (MI), que compreende o conjunto dos inúmeros microrganismos que habitam o intestino humano. A MI executa uma série de funções que mantém a saúde do nosso organismo. Assim, este trabalho visa avaliar se o uso de probióticos pode evitar a infecção de Giardia lamblia em enterócitos in vitro. Para restaurar ou reparar os danos causados à MI pelo parasita, foram usados probióticos comuns, que já são utilizados no tratamento de parasitas, sendo eles o Florax SM, que contém a levedura Saccharomyces cerevisiae, que é encontrada no intestino humano, e o Enterogermina, que contém a bactéria Bacillus clausii. Primeiramente, foram cultivadas as células da linhagem Caco-2 em cultura, as quais foram cultivadas em uma estufa a uma temperatura de 37° C e em uma atmosfera com 5% de CO2. Em seguida, foi realizado um experimento para verificar o efeito da incubação com probióticos na viabilidade das células da linhagem Caco-2 usando um equipamento que realizou a medição da absorbância em dois comprimentos de onda e calculando a média dos valores de absorbância adquiridos. Após isso, foi realizado o cultivo de Giardia sp. em uma estufa a 37 °C em tubos de vidro 13 × 100 mm preenchidos com meio de cultura TYI-S-33 suplementado com 10% de soro bovino adulto, 0,5 mg mL-1 de bile bovina e 1% de solução antibiótica-antimicótica. Por fim, foram realizados dois ensaios com o objetivo de verificar se a presença dos probióticos afetava a curva de crescimento das células da linhagem Caco-2. Em ambos os ensaios as amostras ficaram incubadas por 72 horas até a contagem, através da qual foram comparadas as curvas de crescimento. Durante a fase experimental, foi observado nos ensaios nos quais os probióticos foram introduzidos 24 horas após e ao mesmo que as células, respectivamente, que o grupo controle apresentou 423 000 e 105 000, enquanto grupo experimental que continha Enterogermina apresentou 93% e 59,5% e o que possuía Florax 95,5% e 85,7% de células se comparado ao controle (100%). Assim, pode-se concluir até o momento que a Enterogermina afeta negativamente o crescimento e reprodução das células enquanto o Florax SM não mostrou diferença relevante. Futuramente os experimentos serão repetidos com a Giardia sp. referentes à curva de crescimento das células intestinais cultivadas com o parasita. Ainda, será realizado o teste de adesão do parasita quando incubado com os probióticos e o teste de permeabilidade das células durante a coinfecção de Giardia lamblia, S. cerevisiae e B. clausii. Ambos os testes serão conduzidos também com outro método de cultivo de células, o scaffolding (modelo 3D de cultivo), que melhor se aproxima das condições in vivo, se comparado à monocamada. A análise estatística também será realizada.