PROJETOS

CULTIVO DA MIKANIA LAEVIGATA IN VITRO: BUSCANDO MAIORES TEORES DE CUMARINA PARA TRATAMENTO DA ASMA

Aluno(a): Lara Johnsen Villas Bôas Stefani
Prof.(a) Orientador(a): Carolina Lavini Ramos e Luciana Saraiva Filippos
Cientista Qualificados: Igor Cesarino e Marcella Soares
Professora Coorientadora: Sandra M. Rudella Tonidandel

Ano: 2020

Premiações

Resumo

A Asma é uma doença inflamatória crônica causada pela interação de células inflamatórias e estruturais das vias aéreas com mediadores alérgicos. Em 2007, a Organização Mundial da Saúde estimou que 300 milhões de pessoas em todo o mundo são asmáticas, potencialmente causando até 250.000 mortes por ano. Portanto, vários tratamentos são pesquisados, como o uso de cumarinas. Esse metabólito secundário está abundantemente presente na espécie Mikania laevigata ou Guaco, responsável por inibir a sinalização de células de transcrição pró-inflamatória e modular a função linfocitária. Para aumentar as taxas de cumarina e tornar a aplicação medicinal de cada planta mais econômica e sustentável, foi criada uma metodologia com 4 etapas interdependentes: padronização cultura in vitro por micropropagação e calogênese; formulação do protocolo de cultivo experimental; quantificação de cumarinas; realização de testes moleculares e engenharia genética. Meristemas de indivíduos Guaco foram inoculados in vitro pelas técnicas selecionadas. Foram testados diferentes meios de cultura suplementados com diferentes substâncias (BAP, ANA, AG3, Kin, 2,4- D, sacarose e carvão ativado). Os explantes foram analisados quanto à viabilidade, cor, contaminação e necrose. Os meios de cultura não suplementados foram mais eficazes para anti-necrose, mas sujeitos a contaminação. A porcentagem de gemas necróticas está relacionada à posição no meio de cultura e/ou lesões causadas durante o corte. A contaminação, por outro lado, é explicada pela presença de fungos endofíticos em Guaco. A calogênese é a técnica mais adequada para a execução das etapas experimentais, pois é específica para analisar metabólitos secundários, sendo necessária a otimização da friabilidade dos calos para possibilitar próximas etapas de cultivo e metodologia.